Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan sediaan hair tonic spray berbahan dasar ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata) dan mengevaluasi efektivitasnya dalam merangsang pertumbuhan rambut pada kelinci (Oryctolagus cuniculus). Ekstrak sambiloto diperoleh melalui metode maserasi dengan etanol 96% dan diformulasikan dalam tiga konsentrasi, yaitu 1%, 2%, dan 3%. Evaluasi stabilitas sediaan meliputi uji organoleptik, pH, viskositas, homogenitas, dan uji iritasi kulit pada kelinci. Uji efektivitas dilakukan dengan mengaplikasikan hair tonic spray pada punggung kelinci selama 21 hari, diikuti pengukuran panjang rambut setiap 7 hari. Hasil penelitian menunjukkan bahwa seluruh sediaan memiliki stabilitas fisik yang baik, tidak terjadi perubahan warna, bau, maupun konsistensi selama penyimpanan. Nilai pH berada dalam rentang aman untuk kulit (5,32–6,29), viskositas dan homogenitas memenuhi standar sediaan cair. Uji iritasi menunjukkan bahwa sediaan tidak menyebabkan reaksi iritasi pada kulit kelinci. Pada uji pertumbuhan rambut, kelompok yang diberi hair tonic spray dengan konsentrasi ekstrak sambiloto 3% menunjukkan peningkatan panjang rambut paling signifikan dibandingkan kelompok kontrol dan konsentrasi lebih rendah, dengan rata-rata pertumbuhan 1,8 cm dalam 21 hari. Analisis statistik menunjukkan perbedaan bermakna (p<0,05) antara kelompok perlakuan dan kontrol. Kesimpulan dari penelitian ini adalah hair tonic spray berbasis ekstrak sambiloto, khususnya pada konsentrasi 3%, efektif meningkatkan pertumbuhan rambut pada kelinci dan aman digunakan. Temuan ini mendukung potensi sambiloto sebagai bahan aktif alami dalam pengembangan produk perawatan rambut.